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槐花中總黃酮含量的測(cè)定
來(lái)源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2024-05-27 | 355 次瀏覽 | 分享到:

黃酮類化合物屬于植物的次生代謝產(chǎn)物,在植物界分布很廣,大多數(shù)情況下和糖苷鍵結(jié)合成苷類或碳糖基,有的還以游離形式存在。黃酮的藥用作用實(shí)在太多了,比如預(yù)防心腦血管疾病等。黃酮類化合物在植物體內(nèi)的形成,是由葡萄糖經(jīng)過(guò)莽草酸途徑和乙酸-丙二酸途徑,生成羥基桂皮酸和三個(gè)分子的乙酸,然后合成查爾酮,再衍生出各類的黃酮類化合物。



測(cè)定槐花中的總黃酮含量,其基本原理是:利用溶液中的鋁離子和總黃酮中的羥基或甲氧基發(fā)生絡(luò)合作用,在強(qiáng)酸的條件下形成穩(wěn)定的有色絡(luò)合物。最后,利用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定產(chǎn)物的吸光度,并使用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出槐花中的總黃酮含量。



標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定,分別稱取對(duì)照品1,2,3,4,5,6mL,各自放在25mL容量瓶中,加水到6.0mL,加亞硝酸鹽溶液,混勻后加入硝酸鋁溶液,再加入氫氧化鈉溶液,最后加水定容到刻度。以空白試劑為對(duì)照,在分光光度計(jì)500nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。以測(cè)定的吸光度值為縱坐標(biāo),以對(duì)照品對(duì)應(yīng)濃度為橫坐標(biāo),繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線,并計(jì)算出回歸方程。


對(duì)樣品進(jìn)行處理,將槐花粉碎,加入甲醇,超聲30min后過(guò)濾,精密吸取10mL,加水定容至100mL的容量瓶中備用。檢測(cè)的方法,和標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定吸光度的步驟相似,根據(jù)測(cè)定的吸光度值,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算出樣品中的總黃酮含量。


注意事項(xiàng):樣品精確稱量,避免出現(xiàn)誤差。在強(qiáng)酸的條件下進(jìn)行反應(yīng),要注意安全,避免出現(xiàn)腐蝕。


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